Análisis cualitativo de enzimas, Monografías, Ensayos de Bioquímica

¡Descarga Análisis cualitativo de enzimas y más Monografías, Ensayos en PDF de Bioquímica solo en Docsity! Escuela de Ciencias de la Salud Universidad del Valle de México 1 Práctica 10.Análisis cualitativo de enzimas. Alcalá Cisneros Andrés, García Álvarez Jericó Noé, García Torres Miguel Ángel, Rodríguez Camarena Andrea Patricia, Vásquez Morales Cassandra Monet, Villegas Henze Michelle. Asignatura: Procesos Metabólicos Lic. En QFBT Ciclo C1-2022 Fecha de entrega: jueves 2 de junio de 2022 Docente: Dra. En C. Guerra Renteria Aracely Suggey Resumen Las enzimas son proteínas que controlan todo tipo de reacciones químicas que pueden suceder dentro de nuestro cuerpo, cada enzima actúa sobre una sustancia concreta como una llave y una cerradura y se pueden clasificar basada en su reacción, por consiguiente toda reacción también requiere de factores para poder llevar a cabo una reacción. Es por eso que al determinar la presencia de enzimas en productos de origen animal o vegetal por medio de reacciones químicas específicas podremos identificar la acción enzimática que contiene la catalasa, peroxidasa y tirosinasa. A continuación, se realizó un reconocimiento de la catalasa de los tejidos a analizar, una desnaturalización de igual forma de la catalasa, la determinación de la peroxidasa en tejidos a analizar, la determinación de la tirosinasa y finalmente se realizó una prueba llamada pirogalol, en la parte de resultados se puede observar las (figuras 1,2 y3) con los tejidos y sus distintas pruebas, en el análisis se dividió en las distintas pruebas y nos pudimos dar cuenta de las diferentes reacciones que tienen los tejidos que se analizaron. Palabras Clave: análisis cualitativo, catalasa, enzimas, peroxidasa, prueba pirogalol, tirosinasa, Introducción Las enzimas son proteínas “especializadas” y controlan todas las reacciones químicas de nuestro cuerpo. Hay enzimas en todo lo que está vivo. Son catalizadores, porque cada reacción química necesita una enzima para que se realice, es decir, todo lo que se transforma lo hace gracias a una enzima. (V,2016) Cada enzima actúa sobre una sustancia concreta, como una llave y una cerradura.Un tipo de reacción es: la llave cerradura que en efecto hace alusión a su Escuela de Ciencias de la Salud Universidad del Valle de México 2 nombre, porque el sustrato y sitio activo encajan correctamente como una llave y una cerradura, también este encaje es tan preciso, que algún otro elemento no puede integrarse a esta enzima ya que no encajaría con ellos. (Figura.1.Modelo llave y cerradura) El metabolismo es una serie de reacciones químicas, efectuadas en las células. Estas reacciones se realizan a través de las enzimas. Las enzimas son las mediadoras del metabolismo, responsables de cada reacción que ocurre en la célula. Sin las enzimas, las reacciones metabólicas procederán tan lentamente que serían imperceptibles.(Chan, E ,2018) Las enzimas se clasifican en base a la reacción específica que catalizan. ● Oxidoreductasas: Este tipo de enzimas catalizan la transferencia de electrones de un compuesto a otro. Casi siempre los electrones van acompañados de portones. ● Transferasas: La reacción que catalizan estas enzimas es la de transferir un grupo químico de un compuesto a otro ● Hidrolasas: Como su nombre lo dice, estas enzimas catalizan reacciones de hidrólisis. ● Liasas: Las enzimas de este tipo agregan (o sustraen), grupos químicos a dobles ligaduras. ● Isomerasas: Estas enzimas transforman un compuesto en alguno de sus isómeros. (Recuerde que los isómeros son compuestos que tienen los mismos átomos pero diferente arreglo en el espacio). ● Ligasas: Estas enzimas forman uniones covalentes entre dos compuestos, la reacción es endergónica y requieren de la ruptura de moléculas de ATP que proporcionan energía.(Guerra, J, J,M, 2016) Factores que afectan la actividad enzimática La actividad enzimática puede verse afectada por diversos factores, como temperatura, pH y concentración.Las enzimas funcionan mejor dentro de rangos de temperatura y de pH específicos, y bajo condiciones que no son las óptimas una enzima puede perder su capacidad de unirse a un sustrato. Temperatura: aumentar la temperatura generalmente acelera una reacción, y bajar la temperatura la hace más lenta. Sin embargo, temperaturas extremadamente altas pueden causar que una enzima pierda su forma (se desnaturalice) y deje de trabajar. pH: cada enzima tiene un rango óptimo de pH. Cambiar el pH fuera de este rango hará más lenta la actividad de la enzima. Valores de pH extremos pueden causar la desnaturalización de la enzima. Concentración de la enzima: aumentar la concentración de la enzima acelerará la reacción, siempre que se disponga de sustrato al cual unirse. Una vez que todo el sustrato esté adherido, la reacción deja de acelerarse, puesto que no hay algo a lo las enzimas adicionales se puedan unir. Concentración del substrato: aumentar la concentración de sustrato también aumenta la velocidad de reacción hasta un cierto punto. Una vez que todas las Escuela de Ciencias de la Salud Universidad del Valle de México 5 (Figura.4. La prueba final de la bencidina fue positiva al tener el color marrón.) (Figura. 5. Prueba del pirogalol donde se busca la Desactivación de la Enzima Peroxidasa) (Figura. 6. Se desnaturalizan las proteínas gracias a la pérdida de las estructuras de orden superior. ) Análisis de Resultados Reconocimiento de la catalasa Principalmente podemos ver en la figura 1 cómo es que la catalasa en los distintos tipos de tejidos tiene efecto, al ser un antioxidante y a través de sus procesos producir agua y oxígeno, se puede deducir que habrá presencia de burbujas que serán principalmente las moléculas de oxígeno que se desprenden de esta reacción. Analizando la figura, podemos darnos cuenta que dentro de los distintos tejidos que se utilizaron, principalmente la carne fue la que presentó una mayor producción de oxígeno a juzgar por el volumen de las burbujas, indicando que tiene una mayor actividad enzimática por parte de la catalasa, niños de ahí en más todos los demás tejidos vegetales presentarse una menor producción. Esto se debe a que la mayoría de los tejidos animales necesitan una mayor producción de esta enzima para evitar la oxidación, Escuela de Ciencias de la Salud Universidad del Valle de México 6 ya que este es tu factor que afecta potencialmente a estos tejidos, incluso en algunos casos podemos ver que algunos organismos vegetales se oxidan con mayor facilidad, esto depende también de la misma enzima. Desnaturalización de la catalasa Durante este proceso cómo se llevaron todos los tejidos a un baño maría, todas las enzimas qué se encontraban en estos tejidos fueron desnaturalizadas, cómo se presenta en la introducción, uno de los factores que afectan a las enzimas para su buen funcionamiento es la temperatura, y a una alta temperatura se rompen los enlaces de estás y se desnaturalizan dejando de funcionar, es por esto que al agregar el peróxido de hidrógeno no se presentó burbujeo en ningún tejido. Determinación de peroxidasa En esta prueba se puede observar en la figura 3, cómo es que la prueba de peroxidasa cambia de coloración, Esto se debe a que la peroxidasa es un catalizador de la descomposición del peróxido de hidrógeno, solamente que durante esta prueba, este reactivo es incoloro cuando está reducido, sin embargo cuando se oxida, en presencia de la peroxidasa y el peróxido de hidrógeno está se va oxidando junto a toda la sustancia, produciendo con su oxidación un color obscuro. Prueba de Pirogalol La prueba de pirogalol dió positivo también porque el rojo de pirogalol es muy reactivo en presencia de radicales libres, tiene una gran actividad y propiedades antioxidantes, al igual que también sirve como indicador en presencia de la oxidación de algún compuesto, es por esto que la peroxidasa tiñó un poco la muestra oxidando el peróxido de hidrógeno. Conclusión Se conoce que las enzimas son reacciones químicas de nuestro cuerpo, básicamente hay enzimas presentes en todo lo que está vivo. Mediante esta práctica se logró determinar la presencia de enzimas en tejidos tanto vegetales como animales mediante las reacciones químicas y físicas que se obtuvo como resultado en cada una de las muestras, esto al ser sometidas a las distintas pruebas utilizadas (desnaturalización de catalasa, reconocimiento de catalasa, prueba de pirogalol y la determinación de peroxidasa). Se lograron los objetivos esperados. Referencias Chan, E. (2018, 13 junio). ¿Metabolismo?. También presente en las células. - Evelyn Chan. Medium. https://medium.com/@evelynchan/metab olismo-tambi%C3%A9n-presente-en-las- c%C3%A9lulas-dddb830ca592 Guerra, J. J. M. (2016). Clasificación de las enzimas | LIBRO ELECTRÓNICO DE BIOQUÍMICA | Juan José Martínez Guerra. Clasificación de las enzimas. https://libroelectronico.uaa.mx/capitulo- 6-enzimas/clasificacion-de-las- enzima.html Khan Academy. (2020). Repaso de enzimas (artículo). https://es.khanacademy.org/science/ap- biology/cellular- Escuela de Ciencias de la Salud Universidad del Valle de México 7 energetics/environmental-impacts-on- enzyme-function/a/hs-enzymes-review V. (2016). Las enzimas son proteínas especializadas y controlan TODAS las reacciones químicas de nuestro cuerpo. Enzimas. https://slideplayer.es/slide/17002626/