Características de diferentes especies de Enterobacterias, Resúmenes de Bacteriología

¡Descarga Características de diferentes especies de Enterobacterias y más Resúmenes en PDF de Bacteriología solo en Docsity! ENTEROBACTERIAS MAG. CÉSAR ALFREDO COBEÑAS VILLARREAL MÉDICO-MICROBIÓLOGO ENTEROBACTERIAS • Bacilos Gramnegativos cortos, entéricos. • Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, forman parte de la flora normal. • Salmonella y Shigella son patógenos. • Anaerobios o aerobios facultativos • Fermentan carbohidratos • También llamados coliformes. R... e a E SEÑOR DE SIPÁN IS | UNIVERSIDAD ENTEROBACTERIAS • Móviles con flagelos peritricos. • Algunos inmóviles (Shigella). • Fermentan en vez de oxidar la glucosa, a menudo produciendo gas. • Son catalasa positivos • Oxidasa negativo • Reducen nitrato a nitrito. • Pueden producir H2S (Proteus) ENTEROBACTERIAS • Las cápsulas son de gran tamaño y regulares en Klebsiella, menos en Enterobacter e infrecuentes en las demás especies. • E. coli y la mayor parte de las otras bacterias entéricas forman colonias circulares, convexas y lisas con bordes distintivos. • Las colonias de Enterobacter son similares pero un poco más mucoides. ENTEROBACTERIAS • Las bacterias del género Klebsiella muestran cápsulas de polisacárido de gran tamaño y falta de motilidad, y por lo general producen pruebas positivas para lisina descarboxilasa y citrato. • La mayor parte del género Enterobacter produce pruebas positivas para motilidad, citrato y descarboxilasa de ornitina y produce gas a partir de glucosa. ENTEROBACTERIAS • Klebsiella, Enterobacter y Serratia por lo general producen reacciones de Voges- Proskauer positivas. PRUEBA DE VOGES- PROSKAUER PRUEBA DE VOGES-PROSKAUER • El metabolismo de la glucosa da como resultado ácido pirúvico, y el metabolismo de éste produce ACETOÍNA (acetil metil carbinol). • La acetoína en presencia de oxígeno y KOH 40% se convierte en diacetilo que al reaccionar con el alfa naftol se produce un complejo rojo: Prueba positiva (lectura en 15min) • Klebsiella, Enterobacter, Serratia: Prueba + ENTEROBACTERIAS • Salmonella: bacilos móviles, fermentan glucosa y manosa sin producir gas pero no fermentan lactosa ni sacarosa. • La mayor parte de las salmonelas producen H2S. • Son patógenas para el ser humano. Fiebre Tifoidea. Los sistemas de secreción tipo tres (SST3) son “nanojeringas” o “inyectisomas” de origen proteico que se ensamblan en las membranas celulares de las bacterias que las producen, y que permiten la entrega de proteínas de virulencia bacteriana a las células eucariotas que infectan. Escherichia coli • Se asocia a múltiples enfermedades, que incluyen la gastroenteritis e infecciones extraintestinales, como las ITU , meningitis y sepsis. • Multitud de cepas son capaces de producir enfermedad y algunos serotipos se asocian a una mayor virulencia (p. ej., E. coli O157 es la causa más frecuente de colitis hemorrágica y el síndrome hemolítico urémico). A/B, anclaje/borramiento;/ADN/, ácido desoxirribonucleico; ELISA, análisis de inmunoadsorción ligada a enzimas:LT, toxina lábil; PCR, reacción en cadena de la polimerasa; ST, toxina estable. A/B, anclaje/borramiento;/ADN/, ácido desoxirribonucleico; ELISA, análisis de inmunoadsorción ligada a enzimas:LT, toxina lábil; PCR, reacción en cadena de la polimerasa; ST, toxina estable. Escherichia coli ENTEROTOXIGÉNICA ECET • Infecciones más frecuentes en niños pequeños de países en vías de desarrollo. • Se adquieren fundamentalmente por el consumo de aguas o alimentos contaminados por heces. • No se produce la transmisión de persona a persona. • La diarrea secretora causada por ECET se produce tras un período de incubación de 1 -2 días y persiste durante un promedio de 3-5 días. Escherichia coli ENTEROTOXIGÉNICA ECET • La LT-I está formada por una subunidad A y por cinco subunidades B idénticas. • Las subunidades B se unen al mismo receptor que la toxina del cólera (gangliósidos GM1), así como a otras glucoproteínas de superficie en las células epiteliales del intestino delgado. Escherichia coli ENTEROTOXIGÉNICA ECET • Después de la endocitosis, la subunidad A de LT-I atraviesa la membrana de la vacuola e interacciona con una proteína de membrana [Gs] que regula la adenilciclasa. • Resultado: Aumento de las concentraciones de monofosfato de adenosina cíclico (AMPc), lo que produce un incremento de la secreción de cloruro y una disminución de la absorción de cloruro y de sodio, que se manifiestan con diarrea acuosa. Escherichia coli ENTEROTOXIGÉNICA ECET • Los genes de LT-I y STa se encuentran en un plásmido transferible, que puede portar también los genes para las adhesinas factores de colonización (CFA/I, CFA/II, CFA /III). • Los factores de colonización son fimbrias que reconocen unos receptores glucoproteícos específicos de la célula hospedadora (esto define la especificidad de hospedador). Escherichia coli ENTEROTOXIGÉNICA ECET • La aparición de enfermedad requiere la actuación de la toxina y los factores de colonización. • La enfermedad causada por la STa es indistinguible de la asociada a la LT-1. Escherichia coli ENTEROPATÓGENA ECEP • Principal causa de diarrea infantil en los países pobres. • A diferencia de la enfermedad por ECET, la ECEP se transmite de persona a persona. • La enfermedad se caracteriza por una diarrea acuosa que puede ser grave y prolongada. Puede asociarse a fiebre y vómitos. Escherichia coli ENTEROPATÓGENA ECEP • Tras la unión laxa mediada por los BFP, se produce una secreción activa de proteínas hacia el interior de la célula hospedadora epitelial por el sistema de secreción de tipo III bacteriano. • Una proteína, el receptor de la intimina translocada (Tir), se inserta en la membrana de la célula epitelial y actúa como receptor de una adhesina de la membrana externa bacteriana, la intimina. Escherichia coli ENTEROPATÓGENA ECEP • La unión de la intimina con Tir determina la polimerización de la actina y la acumulación de elementos del citoesqueleto por debajo de las bacterias ancladas, con pérdida de la integridad de la superficie celular y muerte de la célula. Escherichia coli ENTEROAGREGATIVA ECEA • Implicadas en una diarrea acuosa, persistente y con deshidratación en niños de los países en vías de desarrollo. • Las bacterias se caracterizan por su autoaglutinación en una disposición en “pilas de ladrillos”. • Este proceso viene mediado por las fimbrias de adherencia agregantes I (AAF1), unas adhesinas parecidas a los BFP responsables de la formación de microcolonias en ECEP. PÉRDIDA DE LÍQUIDOI LÍ I Escherichia coli ENTEROHEMORRÁGICA ECEH • Causan con mayor frecuencia enfermedad en los países desarrollados. • Incidencia máxima se describe en niños menores de 5 años. • La mayor parte de las infecciones se explican por el consumo de ternera u otros derivados cárnicos poco cocinados, agua, leche no pasteurizada o zumos de fruta (p. ej., zumo de manzana elaborado a partir de manzanas contaminadas con heces del ganado], verduras crudas como espinacas o frutas. Escherichia coli ENTEROHEMORRÁGICA ECEH • La ingesta de menos de 100 bacterias puede causar enfermedad y se describe la transmisión de persona a persona. • La enfermedad va desde una diarrea leve no complicada hasta una colitis hemorrágica con dolor abdominal intenso y diarrea sanguinolenta. • Inicialmente, la diarrea con dolor abdominal aparece en los pacientes tras 3-4 días de incubación. Los vómitos se describen en la mitad de los pacientes, pero no suele aparecer fiebre alta. Escherichia coli ENTEROHEMORRÁGICA ECEH • La cepa más frecuente de ECEH es el serotipo O157:H7, aunque la enfermedad se ha asociado con otros serotipos como E. coli O104:H4. • Estas cepas representan clones evolucionados a partir de ECEP y expresan actividad de anclaje y borramiento. Escherichia coli ENTEROHEMORRÁGICA ECEH • Han adquirido la toxina Shiga (es decir, Stx-1, Stx-2 ó ambas). • Stx-1 es básicamente idéntica a la toxina Shiga producida por Shigella disenteriae (de ahí el origen del nombre); Stx-2 muestra una homología del 60%. • Ambas toxinas se adquieren a partir de bacteriófagos lisogénicos. Escherichia coli ENTEROHEMORRÁGICA ECEH • Ambas poseen una subunidad A y cinco subunidades B, y estas últimas se unen a un glucolípido específico de la célula del hospedador (globotriaosilceramida, [Gb3]). • Hay una alta concentración de receptores de Gb3 en las vellosidades intestinales y en las células endoteliales del riñón. Escherichia coli ENTEROHEMORRÁGICA ECEH • El SHU se ha asociado sobre todo a la producción de Stx-2, que destruye las células endoteliales del glomérulo. • Las lesiones en las células endoteliales inducen activación de las plaquetas y acumulación de trombina, lo que a su vez da lugar a disminución del filtrado glomerular e insuficiencia renal aguda. Escherichia coli ENTEROHEMORRÁGICA ECEH • Las toxinas Shiga estimulan además la expresión de citocinas inflamatorias (p. ej., factor de necrosis tumoral ϒ (TNF-ϒ), interleucina 6 (IL -6) que entre otros efectos, aumentan la expresión de Gb3. Escherichia coli ENTEROINVASIVA ECEI • Las cepas patogénicas se asocian fundamentalmente a un número limitado de serotipos O: O124 , O143 y O164 . • Las cepas presentan una estrecha relación con las propiedades fenotípicas y patógenas de Shigella. • Las bacterias son capaces de invadir y destruir el epitelio del colon para producir una enfermedad que se caracteriza inicialmente por diarrea acuosa. Macrófago Pilitipo 1 ENTEROBACTERIAS IDENTIFICACIÓN Y AISLAMIENTO • Capacidad de fermentar la lactosa (como el agar McConkey, medio selectivo): cepas fermentadoras de lactosa (p. ej., Escherichia, Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter y Serratia; colonias de color rosado-púrpura en agar McConkey) de las cepas que no fermentan la lactosa o lo hacen lentamente (p. ej., Proteus, Salmonella, Shigella y especies de Yersinia; colonias incoloras en agar M cConkey) • Agar Mac Conkey: las sales biliares y el cristal violeta ejercen una inhibición significativa sobre las bacterias Grampositivas. La lactosa y el indicador rojo neutro permiten comprobar la degradación de este disacárido. Las colonias lactosa positivas (E. coli) aparecen rojas con halo turbio; las lactosas negativas ( Salmonella spp) son incoloras. PRUEBAS BIOQUÍMICAS Cuando no hay desaminasa ni descarboxilasa, en la parte inclinada se observará una alcalinización del medio por crecimiento y muerte bacteriana, la cual hará que esta parte se observe de color violeta (K) y en la parte profunda, acidificación por los productos terminales de la fermentación de la glucosa. En este caso, la parte profunda se observará de color amarillo (A). El púrpura de bromocresol es el indicador de pH. LISINA HIERRO AGAR La decarboxilación de la lisina produce la amina cadaverina que alcaliniza el medio por eso vira el indicador a color violeta. La decarboxilación de la lisina tiene lugar en medio ácido, por lo que es necesario que la glucosa sea previamente fermentada. k/k E. coli LISINA HIERRO AGAR La desaminación de la lisina produce un ácido alfa ceto carbónico que al combinarse con la sal de hierro y en presencia de oxígeno forma un color violeta rojizo (R). (R/A) Ejemplo Proteus PRUEBA DE INDOL Producción de indol: Esta prueba se desarrolla para determinar si la bacteria en estudio está en capacidad de desdoblar el indol de la molécula de triptófano; el indol es uno de los componentes de la degradación metabólica del aminoácido triptófano. Las bacterias que poseen la triptofanasa son capaces de hidrolizar y desaminar el triptófano con producción de indol, ácido pirúvico y amoniaco. La prueba se basa en la formación de un complejo rojo cuando el indol reacciona con el grupo aldehido del p- dimetilaminobenzaldehido. Este es el principio activo de los reactivos de Kovacs y Ehrlich, utilizados para la identificación de producción de indol por parte de los microorganismos. Salmonella sp. no tiene la capacidad de generar el indol por lo cual no se presenta ninguna reacción en el medio imacraddin 2000)- SIM (SULFURO-INDOL-MOTILIDAD) MOTILIDAD POSITIVA • Presencia de turbidez difusa en el medio. • E. coli MOTILIDAD NEGATIVA • Presencia de crecimiento sólo en el sitio de punción. • Klebsiella oxytoca Bacteria Prueba de TSI Prueba de LIA Prueba de Citrato Prueba de Indol Producción de H2S Gas Movilidad E. coli A/A Decarboxila K/K Negativ o Positivo Negativo (+) Positivo Salmonella Typhi K/A Decarboxila K/K Negativ o Negativo Positivo/ Negativo (-) Positivo Salmonella spp K/A Decarboxila K/K; K/A Positivo Negativo Positivo (+) Positivo Shigella dysenteria e* K/A Negativo K/A Negativ o Positivo Negativo (-) Negativo Shigella flexneri k/A Negativo K/A Negativ o Positivo Negativo (-) Negativo * Todas las especies de Shigella fermentan el manitol excepto S. dysenteriae l i i ll l i l . i