Práctica 8: Ensayo de absorción de glucosa en Introducción a las ciencias Biotecnológicas, Monografías, Ensayos de Biotecnología

¡Descarga Práctica 8: Ensayo de absorción de glucosa en Introducción a las ciencias Biotecnológicas y más Monografías, Ensayos en PDF de Biotecnología solo en Docsity! Universidad del valle de México Practica numero 8: Ensayo de absorción de glucosa José Alberto Maldonado Barajas, Erick Leyva Leon Asignatura: Introducción a las ciencias Biotecnológicas Licenciatura: QFBT Periodo: 2021-1 Fecha de entrega: 04/06/2021 Docente: Dr en C. Abril Ivett P. Gómez Guzmán RESUMEN: La glucosa, azúcar prácticamente que se encuentra en nuestro organismo para ser más específicos en la sangre, hay numerosos ensayos de cómo obtener la medida de glucosa de nuestra sangre, ya que muchas personas sufren de diabetes tanto tipo 1 como tipo 2, por lo tanto también se debe conocer lo que es la insulina, que es lo que normaliza los niveles de azúcar en la sangre y esto puede ser muy útil para salvar hasta la propia vida. Palabras clave: Glucosa, insulina, diabetes, organismo, azúcar, presión. INTRODUCCIÓN: Glucosa: Es posible que conozcas la glucosa con otro nombre: azúcar en la sangre. La glucosa es la clave para mantener los mecanismos del cuerpo funcionando de manera óptima. Cuando tus niveles de glucosa son óptimos, con frecuencia no lo notas. Sin embargo, cuando se desvían de los límites recomendados, notarás el efecto no saludable que tiene en el funcionamiento normal del cuerpo. (Kathleen, 2017) Entonces, ¿qué es la glucosa, exactamente? Es el más simple de los carbohidratos, lo que lo hace un monosacárido. Esto significa que tiene azúcar. Pero, no es el único. Otros monosacáridos incluyen la fructosa, la galactosa y la ribosa. (Kathleen, 2017) ¿Cómo procesa el cuerpo la glucosa? Cuando comemos, comenzamos a trabajar de inmediato para procesar la glucosa. Las enzimas empiezan el proceso de descomposición con la ayuda del páncreas. El páncreas, que produce hormonas como la insulina, es una parte integral de cómo nuestro cuerpo trata la glucosa. Cuando comemos, el cuerpo le avisa al páncreas que necesita liberar insulina para tratar el incremento del nivel de azúcar en la sangre. Sin embargo, algunas personas no pueden confiar en que su páncreas aparecerá para hacer el trabajo que se supone debe hacer. Una forma en la que ocurre la diabetes es cuando el páncreas no produce insulina de la manera adecuada. En este caso, las personas necesitan ayuda externa (inyecciones de insulina) para procesar y regular la glucosa en el cuerpo. Otra causa de diabetes es la resistencia a la insulina, en donde el hígado no reconoce la insulina que está en el cuerpo y continúa produciendo cantidades inadecuadas de glucosa. El hígado es un órgano importante para el control del azúcar, ya que ayuda con el almacenamiento de la glucosa y produce glucosa cuando es necesario. Si el cuerpo no produce suficiente insulina, puede ocasionar la liberación de ácidos grasos libres de las reservas de grasa. Esto puede ocasionar una condición llamada cetoacidosis. Las cetonas (residuos creados cuando el hígado descompone la grasa) pueden ser tóxicas en grandes cantidades. (Kathleen, 2017) Vías de insulina Una vez que la insulina interacciona con su receptor y éste es activado, se inicia el encendido de cascadas de señalización que dependen de un orquestado número de interacciones proteicas. Dos vías principales de transducción son activadas por acción de la insulina: la vía del fosfatidilinositol 3-cinasa (PI3K) y la vía de las cinasas activadas por mitógenos (MAP cinasas). Ambas vías regulan la mayoría de las acciones de la insulina asociadas a la regulación del metabolismo energético, de la expresión genética y de efectos mitogénicos. vía de señalización de las MAP cinasas. Los efectos de la insulina en la regulación de la síntesis de proteínas son mediados principalmente a través de la activación de la vía de señalización de las MAP cinasas La fosforilación en residuos de Tyr del dominio citoplasmático del IR, promueve la asociación de la proteína Shc, la cual une al complejo Grb2/ SOS; SOS es un factor recambiador de nucleótidos de guanina (GEF), capaz de activar a Ras. La activación de Ras (GTP-Ras) inicia el encendido de la cascada de las MAP cinasas. GTP-Ras se une y activa a Raf-1 que subsecuentemente lleva a la fosforilación y activación de la vía, que involucra el reclutamiento y activación de MEK (también llamada cinasa de MAP cinasa) y de las ERK1 (cinasa regulada extracelularmente 1) y ERK2. Alternativamente a esta vía de señalización que lleva a la activación de las ERK1 y ERK2 (conocidas la realización sobre un medida exacta de glucosa en la sangre Específicos: ❖ Identificar la absorción de glucosa en la sangre mediante los métodos correctos ❖ Conocer los problemas que puede ocasionar un alto nivel de glucosa en la sangre MÉTODO: ★ Investigación previa sobre la glucosa, así como sobre la vía de señalización de la insulina ★ Análisis sobre si se olvida tratar las células con insulina antes de agregar al cóctel radiactivo ★ Realización del ensayo sobre la absorción de la glucosa RESULTADOS: Fig. 3. Limpiar todo con etanol al 70% Fig. 4. Retiración de medios con una bomba de succión. Fig. 5. se añade 1000 µl de medio sin suero en todos los pocillos de la placa de 12 pocillos. Fig. 6. El suero mata de hambre a las células durante 2 horas en una incubadora de CO2 . Fig. 7. Agregue Basal a los pocillos 1A, 1B y 1C. Agregue insulina a los pocillos 2A, 2B y 2C. Agregue el extracto de planta X e Y a 3A, 3B, 3C, 4A, 4B y 4C respectivamente. Fig. 8. Incube la placa a 37ºC durante 30 minutos. Fig. 9. Añada 1000 µl de tampón KRP (a temperatura ambiente) en todos los pocillos y lave las células. Fig. 10. Se eliminó el tampón KRP AUTOEVALUACIÓN: 1. La diabetes tipo 2 también se conoce como diabetes juvenil. a. Falso 2. La diabetes tipo 1 es de otras formas llamadas diabetes no insulinodependiente. a. Falso 3. En la diabetes tipo 1, el páncreas produce poca o ninguna insulina. a. Cierto 4. El cóctel radiactivo contiene 2-desoxi glucosa 10 um y 0.25uCi de 2 desoxi-D- (3H)- glucosa. a. Cierto 5. En el ensayo de absorción de glucosa, las células se lisan usando. a. SDS al 0.1% 6. En el ensayo de absorción de glucosa, las células tratadas con insulina y otros extractos de plantas se lavan. a. Tampón de fosfato de Krebs-Ringer 7. La actividad de absorción de glucosa se midió utilizando a. Contador de centelleo líquido 8. ¿Qué células del páncreas liberan insulina en respuesta a un nivel alto de glucosa en sangre? a. Células beta 9. Un ejemplo de enfermedad autoinmune. a. Diabetes tipo 1 10.Las mujeres que tienen diabetes gestacional son más propensas a la diabetes tipo 2. a. Cierto ANÁLISIS DE RESULTADOS: Podemos observar lo que es un ensayo de obtención de glucosa con cada uno de sus pasos explicados, aunque se tienen que seguir específicamente como están descritos ya que un paso erróneo podía echar a perder o contaminar la muestra completa, hay que tener en cuenta que el equipo utilizado es de alta precisión y que se debe utilizar con cuidado. En cuestión a lo que fueron las muestras podemos ver cómo se conservan al momento de colocarlas en la incubadora sabiendo que el suero mata de hambre a las células colocadas seguido podemos ver que se colocan diferentes sustancias en cada uno de los pocillos para ver su reacción después de 30 min. de incubadora. por lo cual vimos cómo cambia su colación un rosa más intenso en todo los pocillos, prosiguiendo de esto se tiene que lavar la célula correctamente por lo cual se ve que utiliza tampón KRB para dejar bien limpio y luego se extrae con la micropipeta. ya por último se agrega el cóctel radiactivo y se coloca en la incubadora al sacarlo podemos ver que las células se vuelven más notorias. CONCLUSIONES: Todos los alimentos nos proporcionan algo a nuestro cuerpo, por eso se dice que una dieta balanceada debido a que lleva todo tipo, algunos nos proporcionan carbohidratos, lípidos, grasas, azúcares, glucosa, etc. Sin embargo, comer en exceso algún alimento que contenga un alto nivel en alguno de los antes mencionados podría traer complicaciones. En el caso de aquellos que contienen un alto nivel de glucosa y azúcares, al tener un alto consume de ellos la glucosa en la sangre aumenta lo que puede ocasionar una problemática muy grande como es la diabetes, la cual hay diferentes tipos y si se hace caso omiso se puede agraviar a tal grado de tener que vivir con diabetes siempre. Es por esto que es relevante conocer los métodos de absorción de glucosa en la sangre y así conocer el índice que una persona contiene. REFERENCIAS: vlab.amrita.edu. (2021). “Ensayo de absorción de glucosa”. 04 de junio de 2021, de vlab.amrita.edu Sitio web: https://vlab.amrita.edu/?sub=3&brch=1 87&sim=948&cnt=1 CN Vishnu Prasad , T. Anjana , Asoke Banerji . (2009). "El ácido gálico induce la translocación de GLUT4 y la actividad de captación de glucosa en las células 3T3-L1". 04 de junio de 2021, de FEBSPRESS Sitio web: https://febs.onlinelibrary.wiley.com/doi/f ull/10.1016/j.febslet.2009.11.092 Jesús Alberto Olivares Reyes y Araceli Arellano Plancarte. (2008). "Bases moleculares de las acciones de la insulina". 04 de junio de 2021, de Fecmed Sitio web: http://www.facmed.unam.mx/publicacio nes/ampb/numeros/2008/01/f_Articulo 2.pdf Kathleen Pointer. (2017). "Todo lo que necesitas saber sobre la glucosa". 04 de junio de 2021, de healthline Sitio web: https://www.healthline.com/health/es/gl ucosa