síntesis de proteínas, Esquemas y mapas conceptuales de Química

¡Descarga síntesis de proteínas y más Esquemas y mapas conceptuales en PDF de Química solo en Docsity! UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLÁN CAMPUS 4 MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA Bioquímica PRÁCTICA No. 8 – Cuantificación de colesterol en suero sanguíneo por el método de Liebermann-Burchard Integrantes: Alemán Rocha Manuel Ambrosio Reyes Vanessa Lizet Anaya Granados Samuel García Mares Melanie Alexa Macias Silva Grecia Ruiz Cruz América Citlali EQUIPO 3 PROFESORES: MVZ Cervantes Aguilar Francisco Javier Dr. en Educ. Reyes Gama Ranulfo Dr. en C. de la E. Rodríguez Huerta Juan Carlos GRUPO: 1151 Índice ● Resumen……………………………… 2 ● Introducción…………………………… 3 ● Marco teórico…………………………. 5 ● Objetivos……………………………… 8 ● Material y metodología……………… 8 ● Resultados…………………………… 11 ● Discusión…………………………….. 12 ● Conclusiones…………………………. 13 ● Referencias…………………………… 14 1 ● Las concentraciones plasmáticas de colesterol LDL tienen importancia en las hembras de producción lechera, ya que estos niveles aumentan a medida que avanza la lactancia. Bauchart (1993) afirma que los receptores para LDL se incrementa conforme aumentan los niveles de estrógenos. Es probable que las altas concentraciones de LDL durante el posparto sea un fenómeno necesario para su transporte y distribución (Osorio et al., 2010). Henao-Restrepo et al. (2010) reportaron que el aumento de las concentraciones plasmáticas de LDL tiene un efecto indirecto en la disminución de sus receptores encontrando una asociación inversa con la condición corporal, y que está última se redujo a medida que avanzó la lactancia. Es por ello que deben realizarse evaluaciones de las LP para obtener un mejor conocimiento sobre el estado fisiológico y productivo de los bovinos, siguiendo la recomendación del National Cholesterol Education Program (NCEP). Asimismo, la relación entre el colesterol LDL y el colesterol HDL demuestra ser tres veces más sensible que el obtenido al determinar únicamente colesterol total (Demacker et al., 1984). 4 Marco teórico Colesterol Es una sustancia cerosa, una parte del colesterol de nuestro cuerpo es producida en el hígado, la otra parte la consumimos en alimentos de origen animal altos en grasa, como carne de cerdo y res o leches enteras. Cuando los niveles de colesterol LDL (lipoproteínas de baja densidad) son muy altos y los HDL (lipoproteínas de alta densidad) muy bajos, aumenta el riesgo de la acumulación de colesterol que puede llevar al bloque de las arterias que alimentan de sangre nuestro corazón y cerebro. El análisis de colesterol completo incluye el cálculo de cuatro tipos de grasas en la sangre: Colesterol total: Corresponde a la suma del contenido de colesterol en la sangre. Colesterol de lipoproteínas de baja densidad (LDL): Se lo denomina colesterol "malo". Una cantidad excesiva en la sangre produce la acumulación de depósitos de grasa en las arterias (aterosclerosis), que reduce el flujo sanguíneo. Estas placas a veces se rompen y pueden provocar un ataque cardíaco o un accidente cerebrovascular. Colesterol de lipoproteínas de alta densidad (HDL): Se lo denomina colesterol "bueno" porque ayuda a eliminar el colesterol LDL .Por lo tanto, mantiene las arterias abiertas para que la sangre pueda fluir con más libertad. 5 Triglicéridos: Los triglicéridos son un tipo de grasa de la sangre. Al comer el cuerpo convierte las calorías que no necesita en triglicéridos, que se almacenan en células grasas. El colesterol desempeña funciones estructurales y metabólicas. Se encuentra anclado estratégicamente en las membranas de cada célula donde modula la fluidez, permeabilidad y en consecuencia su función. Esta regulación implica que el contenido en colesterol de las membranas modifica la actividad de las enzimas ancladas en ellas, así como la de algunas proteínas transportadoras y de receptores de membrana. El colesterol proviene de la dieta o es sintetizado por nuestras células (principalmente en los hepatocitos); es precursor de otras biomoléculas fisiológicamente importantes tales como, las hormonas esteroideas (andrógenos, estrógenos, progestágenos, gluco y mineralocorticoides), ácidos biliares y la vitamina D. Sin embargo, la acumulación excesiva de colesterol en tejidos y altas concentraciones en sangre (hipercolesterolemia), pueden tener consecuencias patológicas. Esto es particularmente cierto para las células endoteliales que forman la pared arterial, donde la acumulación de colesterol inicia la enfermedad cardiovascular aterosclerótica. Absorción de lípidos El colesterol y los triglicéridos son absorbidos en el intestino delgado. El colesterol puede ingerirse a través de los alimentos (colesterol exógeno) o proceder de las secreciones biliares y de la descamación de las células epiteliales intestinales (colesterol endógeno), que puede llegar a representar hasta el 50% del colesterol total presente en la luz del intestino delgado (Holt, 1972). La absorción requiere la presencia de ácidos biliares y la formación de micelas. Las sales biliares son secretadas por el hígado y llegan al intestino delgado por medio de la bilis. Cuando la concentración de sales biliares alcanza un nivel suficientemente elevado, dichas sales biliares forman agregados o micelas que permiten la absorción de aproximadamente entre el 30 y el 60% del colesterol libre. En la luz del intestino, los ésteres de colesterol provenientes de las micelas son hidrolizados por la colesterol-esterasa pancreática. El colesterol libre se difunde pasivamente a través de la pared de las células de la mucosa intestinal. En las células intestinales, el colesterol libre se esterifica con ácidos grasos gracias a una enzima, la acil-CoA transferasa o colesterol aciltransferasa (ACAT). Una combinación del colesterol libre y de los ésteres de colesterol se incorpora, entonces, a los quilomicrones. En la luz intestinal, los triglicéridos son hidrolizados por la lipasa pancreática a monoglicéridos, diglicéridos y ácidos grasos libres, los cuales se unen al colesterol, los fosfolípidos y las sales biliares y forman micelas mixtas. Estas micelas liberan los monoglicéridos, los diglicéridos y los ácidos grasos libres en la mucosa intestinal, donde son absorbidos En las células intestinales, los monoglicéridos y los diglicéridos son reesterificados y dan lugar a los triglicéridos. Estos últimos se incorporarán a los quilomicrones con 6 Material que deberá traer cada equipo ● Toallas absorbentes. ● Plumón indeleble. ● Detergente líquido. ● Masking tape. ● Pinzas de disección sin dientes de ratón 1. Medimos con la pipeta 1.5 ml de éter de petróleo del tubo problema y lo transferimos a un tubo mediano. 2. Del tubo estándar, medimos del éter de petróleo los mL que nos indicó el profesor, los cuales se pasaron a 6 tubos medianos. Rotulamos perfectamente los tubos como E1, E2 y así sucesivamente. 3. Colocamos los tubos en baño maría dentro de la campana de extracción hasta que se evapore el éter de petróleo. Se secaron los residuos de agua, ya que de lo contrario al agregar el reactivo de Liebermann-Burchard, se puede producir una reacción de combustión, con la consecuente explosión. 4. Enfriamos los tubos a temperatura ambiente y los envolvimos en papel aluminio. 5. Agregamos 3.5 mL del reactivo de Liebermann-Burchard modificado, el cual fue preparado por el profesor en la campana de extracción de la siguiente forma: a. 20 volumen de ácido acético anhídrido (enfriado previamente por 10 min. a 10° C) más un volumen de ácido sulfúrico concentrado. Se mezcló suavemente y refrigeró por 9 min. Este reactivo deberá usarse dentro de la primera hora de elaboración. b. Después de enfriar la mezcla anterior, se agregaron volúmenes de ácido acético glacial y se mezcló perfectamente. 6. Se agitó y colocó en baño maría a 25° C por 30 min. tapando la boca de los tubos. Al sacar del baño María, tuvimos cuidado de no salpicar las muestras. 7. Se calibró el espectrofotómetro con un tubo blanco, el cual contenía 2.5 ml del reactivo de Liebermann-Burchard, a una longitud de onda de 575 nm. 8. Nos cercioramos de que los tubos para realizar las lecturas estuvieran perfectamente secos antes de verter la mezcla que salió de incubación, ya 9 que como se mencionó, dicho reactivo no debe entrar en contacto con el agua. 9. Realizamos la lectura de absorbancia de cada tubo y anotamos los resultados. 10. Al terminar las lecturas pasamos la gradilla de los tubos cerca de la tarja para que el profesor se haga cargo de los residuos generados. 11. El contenido de los tubos que contenían éter de petróleo debió ser vaciado en el contenedor que estaba etiquetado como RESIDUO. 10 Resultados Absorbancia leída del espectrofotómetro y cálculos de concentración CONCENTRACIÓN ABSORBANCIA 1.53 0.408 0.54 0.146 1.63 0.436 2 0.534 1.06 0.285 1.05 0.281 1.55 0.414 Curva de calibración Absorbancia (y) Concentración de colesterol (x) 11