Taller de astrovirus, Esquemas y mapas conceptuales de Virología

¡Descarga Taller de astrovirus y más Esquemas y mapas conceptuales en PDF de Virología solo en Docsity! UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE MEDICINA CATEDRA DE VIROLOGIA DOCENTE: DRA. CARMEN MOSQUERA TEMA: ASTROVIRUS INTEGRANTES: ABRAHAM OTERO CRUZ GENARO PAZMIÑO FUENTES STEVEN NIZA MONAR VICTORIA PAZ PISCO FELIX PACHECO VASCONES GRUPO:2 SUBGRUPO:5 2020-2021 CI Guayaquil-Ecuador 1975 - Madeley y Cosgrove Demostraron mediante microscopía electrónica la presencia de virus icosaédricos pequeños (28 nm),redondos con aspecto de estrellas de cinco o seis puntas en las heces diarreicas de niños hospitalizados y en recién nacidos con brotes de gastroenteritis en guarderías. 1977 - Snodgrass y Gray Realizaron la detección y transcripción de partículas de astrovirus de 30nm en heces diarreicas de corderos. 1981 - Lee y Kurtz Aislaron por primera vez una cepa de astrovirus humano en cultivo celular y realizaron su propagación en células embrionarias de riñón humanas. 1987 -Grupo de científicos guatemaltecos Encontraron una asociación negativa de astrovirus con el aumento de peso; contribuyendo así a una alta morbilidad en los niños que viven en malas condiciones teniendo un efecto perjudicial sobre su estado nutricional. 1990-1993 En 1990, se relaciona la infección de astrovirus con gastroenteritis en niños como en brotes en adultos. En 1993, se obtiene la secuenciación completa del genoma. 1994-Oishi Examinó las muestras de heces de 38 pacientes identificando Astrovirus en 10 de las muestras fecales. En el mismo año Utagawa y sus colegas identificaron a astrovirus como el agente etiológico de gastroenteritis en tres brotes separados. . 1995-1998-Roger Schnagl, Kate Belfrage y colegas En un estudio realizado en 1995 hasta 1998 de muestras de heces de lactantes y niños ingresados en el Hospital Alice Springs en Australia encontraron Astrovirus por la transcripción reversa-PCR en 33 de 495 muestras de heces estudiadas. Índice CLASE 1: RESEÑA HISTORICA Y MORFOLOGICA Genoma del virus  Receptores Virales: VP25, VP27, VP34  Receptores celulares: Molécula de carbohidrato Correlación entre genotipo y serotipo. Hay 8 serotipo-genotipo, el más frecuente es el serotipo 1 (45 al 92% según el país de estudio). El segundo es el serotipo 2 (35% en México). Una sola molécula de ARN ARN monocatenario positivo Tiene tres ORFs VP26, VP29 y VP32 (componentes de la cápside) ORF2 codifica proteínas estructurales Por proteólisis se obtienen tres proteínas estructurales Estas participan en la transcripción el ARN y la replicación ORF1a y ORF1b codifican proteínas no estructurales EFECTOS FISICOS Y QUIMICOS Es uno de los virus más resistentes a los agentes físicos y químicos, manteniendo su infectividad incluso tras la exposición a 60 °C durante 10 minutos y tras la exposición a Ph3. ASTROVIRUS  Órgano diana: Lumen del intestino Abraham Pedro Otero Cruz C.I.: 0955885108 CLASE 3: DETECCION DE INFECTIVIDAD: CULTIVO, AISLAMIENTO Y LÍNEAS CELULARES DEL VIRUS Cultivo y aislamiento del astrovirus Se cultivan en células Caco-2 o células. Es recomendable suplementar el medio de cultivo celular con tripsina (1 a 10 mg/ml) Líneas celulares del virus Las dos líneas celulares más comúnmente utilizadas para el aislamiento de astrovirus son:  Línea humana CaCo-2  PLC/PRF/5 Astrovirus en animales Virus entérico asociado a las diarreas que resulta difícil de aislar en cultivos celulares Reservorio en el ser humano Hospedador asociado con enfermedades en mamífero y aves Su observación inicial es por microscopía electrónica - Se realiza su estudio con materia fecal de recién emisión - Pruebas rápidas de inmunocromatografía - Ensayos ELISA CLASE 4: REPLICACION DEL ASTROVIRUS GENARO MOISES PAZMIÑO FUENTES 1207519149 para adaptar el virus para el crecimiento en cultivo celular. Por último, tiene la presencia de una cola poli (A) en el extremo 3 '. En eucariontes, la poliadenilación es parte del proceso que produce el ARN mensajero maduro (ARNm) para su traducción. PASO 5: TRADUCCIÓN TEMPRANA Las proteínas del astrovirus no estructurales se traducen en dos poliproteínas, nsp1a (∼101 kDa) y nsp1ab (∼160 kDa). Las poliproteínas nsp1a y nsp1ab son escindidas por la serina proteasa viral para producir las proteínas no estructurales individuales. El número y el tamaño de las proteínas no estructurales finales no están completamente dilucidados, y los estudios que utilizan diferentes líneas celulares, serotipos de virus humanos y sistemas de expresión han descrito diferentes productos de procesamiento intermedios y finales. Sin embargo, las conclusiones extraídas de estos informes sugieren que existen al menos cinco proteínas no estructurales. 1. una proteína N-terminal de 20 kDa, probablemente escindida cotraduccionalmente por una signalasa celular que contiene un dominio transmembrana predicho y un dominio de bobinado. 2. una proteína que se prevé que contenga cuatro dominios transmembrana, 3. una serina proteasa de 27 kDa. 4. una fosfoproteína de 21-27 kDa dependiendo de su nivel de fosforilación o procesamiento diferencial que contiene la región hipervariable nsp1a y posiblemente sea la proteína VPg. 5. una ARN polimerasa dependiente de ARN de 57 kDa. PASO 6: REPLICACIÓN VIRAL La replicación del genoma de virus ARN monocatenarios de sentido positivo pertenecientes a varias familias diferentes ha sido bien documentada. Se conocen pocos detalles sobre el astrovirus, pero la información disponible es consistente con estudios anteriores en otros virus ARN de sentido positivo, por lo que es razonable suponer que la replicación del genoma del astrovirus ocurre de manera similar. Sobre la base de esta premisa, se cree que después de la traducción del ARNg y el procesamiento proteolítico de las proteínas no estructurales se forma un complejo de réplica viral, que utiliza el ARNg para producir un ARN de sentido negativo de longitud completa. Este ARN de sentido negativo se detecta de 6 a 12 h después de la infección. El complejo replicado de virus ARN de sentido positivo generalmente contiene el RdRp viral y otras proteínas no estructurales, así como las proteínas huésped necesarias para la replicación del genoma viral. PASO 7: TRANSCRIPCION DE ARN TARDIO El astrovirus es un virus de ARN monocatenario de sentido positivo (Esto quiere decir que tiene el ARN y su genoma del mismo sentido y le es más fácil traducir proteínas). Después de la traducción del ARNg y el procesamiento proteolítico de las proteínas no estructurales se va a formar un complejo de replicasa viral que utiliza el ARNg para producir un ARN de sentido negativo. El ARN de sentido negativo se detecta de 6 a 12 h después de la infección y va a acumular de 0,7 a 4% del ARNg. El complejo replicasa viral contiene RdRp viral, proteínas no estructurales y proteínas de la célula hospedadora en el caso del astrovirus la proteína no estructural es la nspla/4 que va a estar en el extremo C terminal de nspla. Pero se desconoce los requisitos para que el complejo replicasa viral de sentido negativo cambie a la síntesis de sentido positivo y ARNsg y se hace relación con el alfavirus que utiliza el proceso de poliproteínas no estructurales. PASO 8: TRADUCCION DE PROTEINAS TARDIAS El principal producto de traducción del astrovirus ORF2 es una poliproteína de 87-90 kDa sintetizada a partir del sgRNA viral. La proteína antes mencionada se ensambla en partículas virales y luego es escindida en el extremo carboxi por caspasas celulares para producir una proteína de 70 kda (VP70) a través de varios eventos intermedios de escisión que lo hacen las antes mencionadas caspasas celulares. Los viriones están constituidos por V70, pero requieren tripsina para activar completamente su infectividad, este proceso proteolítico divide en tres fragmentos de 25, 27 y 34 Kda que mejoran 105 veces su infectividad PASO 9: ENSAMBLAJE Los complejos de VP90 ensamblan el virión inmaduro en asociación con membranas intracelulares mediante su extremo C-terminal. Luego, varias caspasas celulares clivan VP90, disociando así los viriones de las membranas y generando cápsides virales compuestas por la proteína VP70. El ensamblaje de ARNg en partículas virales requiere la interacción específica de la (s) proteína (s) estructural (es) con señales de encapsidación en el ARN viral y, en el caso de los virus de ARN de sentido positivo. PASO 10: LIBERACION La estructura final brota de la membrana plasmática de la célula infectada y se libera de la célula hacia el espacio extracelular o intersticial. El procesamiento de VP90 hacia VP70 es requerido para que el virus pueda salir de la célula y parecía que la liberación de las partículas formadas por VP70 ocurre sin lisis celular. CLASE 5: EFECTOS DE LOS VIRUS EN LA CELULA VIRUS CITOCIDA Las células desarrollan una respuesta apoptótica tras la infección por astrovirus. La caracterización de esta respuesta apoptótica permitió afirmar que el porcentaje de células apoptóticas es directamente proporcional a la multiplicidad de infección utilizada y que existe una relación directa entre la expresión de las proteínas no estructurales del virus codificadas por el ORF1a y la apoptosis. Además, se identifica un potencial dominio "death domain" (DD) en la proteína nsP1a/4 del virus. Por último, se identifica la activación de la caspasa 8 en la inducción de la apoptosis y se presenta un modelo para explicar el significado biológico de esta inducción de apoptosis por el virus, sugiriendo que la apoptosis sería necesaria para una correcta maduración de las proteínas de la cápside. Félix Pacheco Vasconez