¡Descarga taller de biologia celular y genetica y más Esquemas y mapas conceptuales en PDF de Biología Celular solo en Docsity! TALLER N°6: INTERPRETACION DE RESULTADOS RT PCR EN TIEMPO REAL PARA EL DIAGNOSTICO DE SARS-CoV-2 OBJETIVOS • Conocer metodología RT PCR en Tiempo Real. • Interpretar y realizar la confirmación de muestras con resultado positivo para SARS-CoV-2 INTRODUCCION: La RT-PCR en tiempo real es un método de base nuclear que detecta la presencia de material genético específico de patógenos, como los virus. Inicialmente el método utilizaba marcadores de isótopos radiactivos para detectar materiales genéticos específicos pero, tras la realización de mejoras, el marcado isotópico se ha sustituido por marcadores especiales, que suelen ser colorantes fluorescentes. A diferencia de la RT-PCR convencional, que solo arroja los resultados al final, esta técnica permite observar los resultados de manera casi inmediata mientras el proceso sigue en curso. Aunque actualmente la RT-PCR en tiempo real es el método que más se utiliza para detectar los coronavirus, muchos países siguen necesitando ayuda para poner en marcha la técnica y utilizarla. ALINEAMIENTO DE COMPETENCIAS: CE3. Analiza y aplica las técnicas de biología molecular en la implementación del diagnóstico de enfermedades genéticas e infecciosas. INTRODUCCION Las enfermedades virales emergentes se han convertido en una importante amenaza para la salud pública en todo el mundo en los últimos años. Durante las últimas dos décadas, se han notificado brotes de varias enfermedades virales, incluido los coronavirus. El brote del nuevo coronavirus se informó inicialmente el 31 de diciembre de 2019 por la Organización Mundial de la Salud (OMS). El 12 de enero de 2020, la OMS designó este virus como el nuevo coronavirus "2019-nCoV" y más tarde, fue denominado como el síndrome respiratorio agudo severo coronavirus-2 (SARS- CoV-2) por el Comité Internacional de Taxonomía de Virus (ICTV) debido a su similitud con el SARS-CoV anterior. El 30 de enero de 2020, la OMS declaró este brote viral como una emergencia de salud pública de interés internacional El genoma del SARS-CoV-2 contiene ARN de sentido positivo de una sola cadena encapsulado dentro de una envoltura de membrana con un diámetro promedio de 75-150 nm. La envoltura está cubierta con picos de glicoproteínas que dan a los coronavirus su apariencia de corona. El genoma del SARS-CoV-2 tiene una longitud de unos 30 K nucleótidos. Tiene cuatro proteínas estructurales principales las están codificadas en el genoma viral del SARS-CoV-2: 1. La glicoproteína de superficie de la espiga (S), 2. La proteína de membrana (M), 3. la proteína de la envoltura (E) y 4. La proteína de nucleocapsida (N) RT-PCR es una versión del método de PCR desarrollado explícitamente para la detección de ARN (genómica). RT-PCR es lo suficientemente confiable es una técnica rápida, que produce resultados en unas pocas horas con un alto rendimiento. La técnica RT-PCR se basa en dos reacciones consecutivas: a) conversión de ARN en ADN complementario (ADNc) a través de la enzima de transcripción reversa y b) amplificación de la muestra de ADNc por reacción en cadena de la polimerasa utilizando cebadores específicos de genes y sondas de hidrólisis marcadas con fluorescencia. La RT-PCR es actualmente el estándar de oro para la detección de SARS-Cov-2 debido a su capacidad para medir directamente las partes genómicas virales en lugar de los biomarcadores secundarios, como antígenos o anticuerpos. ACTIVIDAD 1. Se corrieron en el laboratorio molecular X 7 muestras para el Diagnóstico de Covid 19 2. Se programo el equipo (PCR en Tiempo Real) con las siguientes condiciones. ACTIVIDAD 1. Interprete los resultados de los siguientes figuras : Indique si es positiva, negativa o no valida (reproceso) y por que? Figura 1 Figura 2
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