Tinciones bacterianas, Guías, Proyectos, Investigaciones de Microbiología

¡Descarga Tinciones bacterianas y más Guías, Proyectos, Investigaciones en PDF de Microbiología solo en Docsity! INFORME DE TINCIONES PRESENTADO POR: ANGIE VALENTINA FERRER OSPINO DANIEL RICARDO GUERRA GIOVANNI ENRIQUE LEAL RIVERO JESUS DAVID MEDINA CARRETERO JESSICA PAOLA RICO ROSAS DOCENTE: MARLON ARDILA CHAVEZ FUNDACIÓN UNIVERSITARIA SAN MARTIN MEDICINA I PUERTO COLOMBIA/ATLANTICO TÉCNICAS DE COLORACIÓN BACTERIANA (TINCIÓN SIMPLE Y DIFERENCIAL) Es importante que en el siguiente informe antes de tratar el tema de tinciones mencionemos algunas generalidades de las bacterias. BACTERIAS Las bacterias son microorganismos procariotas, que se encuentran dentro del dominio bacteria, su tamaño está entre 0,5 a 5 μm, es por esto que no se pueden ver a simple vista solo pueden ser observadas con el microscopio. Presentan una gran diversidad y de esa gran diversidad no todas son patógenas para el ser humano, hay un mínimo porcentaje que nos pueden causar enfermedades, hay otras que le pueden causar enfermedades a otro tipo de animales, a plantas, etc. Las observaciones microscópicas de las bacterias nos permiten diferenciar los principales tipos morfológicos, existen formas y arreglos característicos para este grupo de procariotas: ● Bacilo; que tiene una forma de bastón o varilla ● Cocos; tienen forma esférica o circular ● Espirales; vibrios, espirilo y espiroquetas ● Otras formas: cuadradas, apendiculares, de estrella y filamentosas GRAMPOSITIVAS La gruesa pared celular de las bacterias grampositivas se encuentra formada por peptidoglicanos. Esta capa gruesa de peptidoglicanos es la responsable de la coloración púrpura de estas bacterias en la tinción de gram. Estas células también contienen dentro de sus componentes gran cantidad de ácido teicoico, el cual permite la estabilización entre las cadenas de glicanos, este ácido teicoico no llega a tocar la membrana plasmática; otro polisacárido que se une a la membrana plasmática es el ácido lipoteicoico, el cual si alcanza a tocar la membrana plasmática y además tiene la misma función de permitir mayor interacción con las cadenas de glicano. GRAMNEGATIVAS La pared celular de las bacterias gramnegativas están compuesta por la membrana plasmática y una membrana externa, es decir, posee dos membranas. Estas dos membranas son las responsables de la tinción de estas gram al color rojo o rosado y ya que la cantidad de cadenas de glicano que posee es poca con respecto a las grampositivas, por lo que su coloración será de este tono. La membrana externa de las gramnegativas es la encargada de la síntesis de antígenos e influye en gran parte para la resistencia a varios antibióticos, principalmente los que actúan sobre la pared de peptidoglicanos que son la debilidad de las bacterias. TINCIONES EN MICROBIOLOGÍA Las tinciones son herramientas de gran utilidad en el laboratorio, nos sirven para para diagnóstico de enfermedades infecciosas. En el transcurrir del tiempo han sido de gran utilidad para la detección de agentes infecciosos y la caracterización de nuevas especies como parásitos, bacterias y hongos. Estas son el resultado de una interacción de un tinte con una superficie. Las tinciones se pueden clasificar como simples, que muestran todo de un solo color y se utiliza un solo colorante, tinción diferencial que es cuando se visualiza más de un color porque se utiliza más de un colorante, tinción específica que es cuando se utilizan anticuerpos marcados con una molécula fluorescente para indicar una estructura celular en particular. Principales técnicas de tinción usadas en Microbiología: Tinción de Gram Se define como una tinción diferencial, ya que utiliza dos colorantes y clasifica a las bacterias en dos grupos; Gram positiva y Gram negativa. Fue elaborada por Hans Christian Gram en 1884. Esta tinción es muy útil en la Microbiología clínica, ya que a partir de muestras clínicas directas provenientes de sitios estériles se puede saber de manera rápida las características de la muestra. El principio de esta tinción se basa en las características de la pared celular de las bacterias Gram negativas que están compuestas por una capa delgada de peptidoglucano y una membrana celular externa, mientras que las bacterias Gram positivas tiene una pared celular gruesa constituida por peptidoglicano y estas no cuentan con membrana externa. Tinción de Wright Fue elaborada por el patólogo James Home Wright en 1902 a partir de modificación de la ya existente tinción de Romanowsky, usada para diferenciar elementos formes de la sangre. Es la tinción más empleada en frotis de sangre periférica o de médula ósea. Está clasificada como tinción policromática, ya que tiñe compuestos básicos y ácidos de las células. Las células se tiñen de esa manera ya que el colorante básico se une a los componentes ácidos de las células, ácidos nucleicos, gránulos en neutrófilos y proteínas ácidas., mientras que en el colorante ácido se une a la hemoglobina, componentes básicos de las estructuras celulares y gránulos de los eosinófilos. Tinción de Ziehl – Neelsen: Tinción diferencial Esta nos permite detectar diferentes tipos de células y se fundamenta en el uso de más de un tinte, un claro ejemplo sería la tinción de Gram Cómo realizar un montaje ya sea para tinción simple o tinción diferencial Primero Se toma la muestra (ya sea de un plato de Petri o de un tubo de ensayo ), si el medio es liquido se toma el aza se introduce en el tubo de ensayo y luego se le hace un frotis al porta objeto con movimientos circulares, si el medio es sólido es necesario colocarle al porta objeto una gota de solución salina, luego se toma la muestra del plato de Petri y se hacen movimientos circulares, como siguiente paso hay que fijar esa muestra atreves de dos métodos físico (calor seco) y químico (el más común es el etanol) se fija con las intenciones de detener el metabolismo de esa bacteria y que se logren impregnar al material de vidrio del porta objeto, en el paso siguiente se procede a echarle el tinte en el caso de la tinción simple después de haberle aplicado el tinte se procede a observar en el microscopio con el objetivo de 100x pero si es el caso de la tinción diferencial vemos que se debe realizar el siguiente protocolo se realizan dos montajes después de haber fijado la muestra se van aplicar los siguientes reactivos primero se agrega cristal violeta y se deja por un minuto transcurrido ese minuto se retira el reactivo y se enjuaga con cuidado se seca en ese momento la muestra se observara de color violeta, segundo agregamos lugol y este ayuda a que el cristal se impregne más volvemos a enjuagar, en tercer lugar echamos alcohol cetona, luego como cuarto y último paso se le vierte un contra tinte y se determina si en Gram negativa o Gram positiva . BACTERIAS ¡Sonmicroorganismos perenecien al dominio 'de0,5 a jun, estos solo pueden servistos en el microscopio. Fstas poseen formas y arezlos. Tinción Simple Se uliliza un solo tinte, se utiliza para visualizacion de formas (cocos, bacilos y espirilos) ancelos (cadenas. pares y tetradas) Bacterias, estos son procasiulos y su lalo vara Tinción Diferencial En esta tecnica emplea mas de dos tintes o colorantes complementarios, sirve para llevar a cabo la Tinción de Gram Tinción En Bacterias organismo DÁSICOS Jste ipo de le es de curga cónica pora tanto va tener afinidad con la parte de la superlcio con carga negativa delas bacterias por ejemplo: AZUL DE METILENO. Es una sustancia organica Compuesta por cromogeno y anxocromo. Esta nos ayuda en la coloracion de aquellas estricturas de ciertas queremos observ: microscopio, principalmente ACÍDICOS Fstetipo detinte es de carga porlo ranto va a tenes afinidad con la parte dela smperfice con carga posiliva delos componefes Celmiares, porejemplo: SAFRANINA. - Fl 90% - 10% acido leicoieo - Es más ancha TINCION GRAM POSITIVA 'a esta constimida por peptidoglicano TINCION GRAM NEGATIVA - 10% dela esticurura es de peptidoglicano - posee una capa adicional de lipopolisacaridos - Lona periplasmatica Tinción en bacterias se le llama al proceso de tinturacion el cual nos ayudaa optimizar la visión de aquello que esirueluras que nos permitan identificar.