Schemi microbiologia e colture cellulari, Schemi e mappe concettuali di Microbiologia

Scarica Schemi microbiologia e colture cellulari e più Schemi e mappe concettuali in PDF di Microbiologia solo su Docsity! COLTURAPORA - Insieme dicatale derivanti dalla stesse call, madre, some tutte identica a mano di mutazionispontance Micromorfologia - morfologia della singold celuld a batterimolto più piccola (rapportoind Macromorf. I morydella colonia a Forma 1 Spessore Margine COLONIA insieme dicellule dei dalla stesse cell. Mdde, senza ricomb. genica e deve essere - distinta e cell. distinte a discreta i cell. Separabili colonia MISTA - colonie con piùtipicell. DInquinamento ↓ Ricombinamento ↓Mancata sep, di piùlinee pure nell isplam. DATA - insieme dicolonie confluenti e non discriminabili & 107 - 109 - Batteri Prelievo deimicrorganismidall AMBIENTE 2000 -eucarioti 3 in a grammo di terra Principi "significatività"del campionamento uniformitàdel prelieve, no deicampioniprete pati alla protocol Rimozione inquinanti a rimozione deidetriti senza alterare l'oggetto di studio Batteri =ph neutro ↳Alimentazione delmicrory. 1 Sterlita matrice solida Eucarioti =Funghi =acidofic: Frazionamento del prelievo -solo per alcune tipologie I matrice liquida TIPOLOGIEDi Preliero SUBSiRATO FILE,onabile SUB. NON FIAZIONABILE Altacarica microbica (mostoin fermentazione)- pipetta Alta carica (parimento di and stalld) · Fluido · TAMPONE -> V per isolamento CONON FIOC *per conta -la conta potrebbe essere sotto stimat Bassa Carida (H0e diid) -> Imbuto buchner Bassa carica (campionare moltosuperficiel ↓ I warry. Potrebbero ere Acta carical suolo e alimenti)- spatole/cacchidi p complementare al catton fioc · SOLI DO · Piastra a fondo mobile Permette il prelievo diretto dalle superfici Spidstr Rodac A Bassa carica(Biscotti, ESTAT, ...) - Spatole/aucch:di DensitàSuperf. basse Imbuto Büchner -Mantiene il campione isolato dall'aspirazione diuna pompa tramite, una membrana filtrante con deiporidi22mm,durante la filtrazione, il filtrato entranella beatd e viene trattenuto da essa, mentreis residuo rimane sulle membrand filtantepresente nell imbuto. Imbuto, beats e memb. filtranteseno tenute insieme ad una pintd. -> s:preberd la memb. es:posit. Se in terreno di coltura, alimentata da nutrientiche cipassano ditoverso a sostengono la crescita delle cellule file a formare colonie D Batteri =3 CONSERV. DEL CAMPIONE · sterilità 1) To normale:solo se eassente il rischio dieccessiva proliferato dicrescita selvative differente ↳Fungni =25 . To controllate PRefrigermento (2/6°) -cerve per limitare la crescita del microbiota Evita che si creino deicristalli all'interno I econgelamento (-201-80°) -quando siteen vandazioni significative di quantitàe composiz del microbiots in tempibrenp si aggiunge glicerolo starle al 17% per un long, piùrapido SELEZIONE . DAVISTA: -CP =102/piastra I Il d -I . Agisce a livello dicolonie ⑧ · Positiva:rilena colonie/cable perchemostrare un fenotipo diff t D DIRETTA: -CP=10t/pidstre terreno selettivo con antibiotic Ireblinte:- CP =102/piastra · NEGATIVO:rilena cellule/ colonie che non sinteressano I piastreterreno permissivo + 1 piastra temer selettivo -> REPLICAPLARAG (3 piastre) -Selezione dimutanti AUOTIOFI nutrizionali A VISTA -ADIRE 11 CP =10 2 CP =107 organismiincapaci di sintetizzare autonorm, un composto I - 10 -S 8 = 10- 3 a partive da compon, inorg di base (es. Selez dimutanti per la FENILALAMINA) r P = -= 10 P=10 2.CP Si sourppon sono le piastre e sievidenziar E=1 =0.001 E =100 D P BINDIRETTAINV.: - CP=107/piastra I bild Type =cellule morte ILDIRETTA IMD. INVERSA CP = 102 c =18 -Si fanno crescere solo le cell. dinteresse a causa dicondit. Selettive different. f = 10 -7 8 = -Terreno selettivo - differenziale: ·Urd ele - SP=3 10 P =1- · ACIDO FLUOMO-ORTICO (FOA) -D es. Chimetebol: 22d FOA=MORTE E =5. 105 E =1 Chine metabolicId FOA=CRESCE CONTA VITALE - NO diCell. Vitali capacidiriprodursie formare colonie presentiinun ampione - cell. metabolic Altive CONTA TOT -> Tutte le cell. Presentiin un campione (vire +vitali + morte) Su FITRO Ye D CONTE VITALI SPANDIMENTO - Su terreno solidific. (spread-plate techniquel DISSEMINAz.- Su terr. Solidif CONTEMICROBICHE R DIRETTA - Thomd-Zeiss CFU:concettostatistico &)TURBIDO METIZIA & MEFELOMENRIAD CONTETOT Quamisti -Dilniz. dicampione B D INDIREN A D Quanti Di DNA & QUANTI DI PROTEINA CONTA VIT. PER SPANDIe. * se is ocido si resa 10 STOMACHER - ↓ ① Prep. Sosp. cell. misceld e emogened un campione ② dilviz. Sadlari nbase do 3 Ad ognidihiz.: . trasferire noal ③ Trasf. della sosp. dai tubialle piastre con terreno agarizz. . spandim. con spatola ·3 repliche PER DISSEM. 22-72 H ① Deposiz. diun quantitativo noto del campione sul fondo diand pidstrina peti sterile no medio didie ② Aggiung. Und quantitànote diterreno dfdrizz. fuso con und T=S0" ↑ ↑o Fattore didiviz. ③ Mescolare con motorotatorio DC =CM. FD ④ lasciar solidific. ~fatt. didibiz. a ml ⑤ Mettere nel termostato a testa in givi FD =b") 10I ⑥ conta delle colonie base di diluiz denz SU FILTRO ① Imbuto di Buchner sterilizz. in auto cave (D +1) ② I, liquido passa attraverso il filtro dopo essersicreato il voto se b =10 = 1DC = CM. 10 ③ Rimoz. del filtro inmodo asettico ④ viere posto se un terreno con dgar se bF10 = DC =cl - b. 10 ⑤ conta delle colonie 3 3 Se b, fbcfb =DC =Cl. 102.3.2. 10 cEL/mL =M. FD. (4.108) p Regald delld ( Metodiper contare Regold della diagonale Crescita Esponenziale . Und popoldz. ideale raddoppia il no di cell. ad ogni generazione (24), il t necessario per duplicarsisi chidad TEMPO DI GENERAZIONE:costante infase esponent. . Parametri fondam - tempo in sei si fa l'analisi (1t) ①Df =c" CONDIZ. IDEAL - Crescita senza problemidifattor limitante (PROTOTROFO - t. digeneraz. (g) ① Df =Di.ch =2 ·ai =2 - Densitàdiincomlo(Di) - Densità finale (D8) ④ n =log, e - no digenerez. (n) 8 At =g.h x 1t =f.log,e At 8 e -8y= log, e I ↑ ⑩ Df =bi . z 0 = E Of 11 Du (*) CRESCITA ARIMERCA-A crescita ad intervallicostanti divalori ->é and reltd viere utilizzataquando non vengono usati fattorilimitanti BloStan - serve a stimare la canc, deiprincipiattivi ed:loro effetti su un sistema biologico,si rmina l'effetto che un'unitàdi volume o peso, preme co su undete ↓ I certo orfani Sme elemento nutritivo, sost. tossica, organismo intero e vitale con tutte le farmaco, fertiliti. funzionalità BIOSESOR:Animali, vegetali, colture microbiche ed enzimi rispondono allo stimolo del principio attivo TEST DI AMES: ·Testgenetico per l'analisidella Gerotossicie diand sost. -D Capacitàche essa posso provocare danni al DNA ·Ambito BIOMEDICO, FARMACEUTICO-InDusimale per ANALISI AMBIENTAL · Es. -Provocare la retromutazione diun carattere autotrofo in un ceppo di batteri mutanti rendendolo capace disopravivere in un terre privo diISTIDIMA