Relatório de biocel métodos histológicos, Notas de estudo de Biotecnologia

Baixe Relatório de biocel métodos histológicos e outras Notas de estudo em PDF para Biotecnologia, somente na Docsity! UNIVERSIDADE FEDERAL DO AMAZONAS – UFAM Curso: Biotecnologia Disciplina: Biologia Celular Professor Doutor: Cleverson Agner Ramos Aula Prática de Biologia Celular Manaus-AM 2013 INTRODUÇÃO Técnicas histológicas baseiam-se na identificação de componentes macromoleculares nas células ou estruturas celulares. No preparo de amostras biológicas os passos são os seguintes: *Coleta do material: é a obtenção da peça, por biópsia ou necropsia. * Fixação: preservação dos caracteres estruturais com glutaraldeído 2%. Esse processo evita a destruição das células por bactérias ou suas próprias enzimas, insolubilizando suas proteínas. * Desidratação: retirada da água dos tecidos com EtOH, passando por concentrações de 70% até o álcool absoluto. * Clarificação/diafanização: retirada do EtOH e gorduras com xilol, deixando o tecido translúcido. O xilol é usado para aumentar a aderência da parafina na amostra. * Infiltração e Emblocamento: uso de parafina líquida para enrijecer o tecido. * Microtomia: promove cortes finos com auxílio do micrótomo. Os cortes variam de 6 a 8 m de espessura. * Secagem: uso de estufa a 37º para adesão do corte na lâmina. * Coloração: uso de corantes específicos para evidenciar estruturas seletivamente. Deve-se usar o corante mais adequado para aquela estrutura que se pretende observar. * Montagem: preservação do animal entre lâminas e lamínulas. O principal tipo de coloração utilizado em histologia é o método de coloração Hematoxilina-Eosina (HE). Método de Cajal por meio dessa técnica pode-se observar que o sistema nervoso central é formado por células individualizadas e não por uma rede contínua. É utilizado impregnação com nitrato de prata, cloreto de mercúrio e de ouro. Método de PAS (do inglês Periodic acid-Schiff) é um método de coloração usado em histologia e patologia. Este método é primariamente usado para identificar glicogênio em tecidos. A coloração PAS é principalmente usada para colorir estruturas contendo uma alta proporção de macromoléculas de carboidratos (glicogênio, glicoproteína, proteoglicanos), tipicamente encontrado em eg. tecidos conjuntivos, mucos, e lâminas basais. Coloração PAS pode ser usada para distinguir entre diferentes tipos de doenças de estocagem de glicogênio. Método de Imuno-Histoquímica combina técnicas histológicas, imunológica e bioquímicas objetivando identificar componentes celulares ou tissulares