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Baixe relatório feito na disciplina de biologia e outras Exercícios em PDF para Biologia, somente na Docsity! Propriedades das enzimas ATIVIDADE LABORATORIAL DISCIPLINA: BIOLOGIA 12º PROFESSORA: MARGARIDA SOARES ELABORADO POR: Carolina Ferreira nº3; Gabriela Brás nº6; Laura Cataldi nº13; Kathleen Teixeira nº28. ÍNDICE: ATIVIDADE LABORATORIAL - PROPRIEDADES DAS ENZIMAS Objetivos Introdução Resultados / Observações Discussão de Resultados Conclusão Bibliografia 2 A ocorrência de uma reação química implica a ruptura de ligações químicas nas moléculas dos reagentes e a formação de novas ligações químicas que dão origem aos produtos de reaccao A energia necessária para que uma reação química seja desencadeada designa-se energia de ativação. 5 ATIVIDADE LABORATORIAL - Propriedades das enzimas Fundamentos Teóricos: Existem diversas substâncias químicas que podem funcionar como catalisadores, mas as mais eficazes e que são utilizadas pelas células são as enzimas. Estes catalisadores biológicos são, na sua maioria, proteínas especiais que têm a capacidade de acelerar as reações químicas. As enzimas apresentam um elevado grau de especificidade, catalisando apenas um determinado tipo de reação química. Uma grande parte das enzimas atua apenas sobre um tipo particular de substância, designada substrato. 6 ATIVIDADE LABORATORIAL - Propriedades das enzimas Fundamentos Teóricos: 7 Esta especificidade pode ser absoluta ou relativa. As enzimas com especificidade absoluta atuam apenas sobre um tipo de substrato. As enzimas que têm especificidade relativa podem atuar sobre um grupo de substratos que, no entanto, têm de ser moléculas semelhantes do ponto de vista químico, isto é, apresentam, por exemplo, o mesmo grupo funcional ou mesmo tipo de ligações químicas. Fundamentos Teóricos: ATIVIDADE LABORATORIAL - Propriedades das enzimas Algumas enzimas são constituídas apenas por material da natureza proteica. No entanto, existem enzimas que apenas conseguem catalisar reações se estiverem associadas a substancias designadas cofatores. Na constituição destas enzimas, é possível distinguir a existência de dois componentes. A apoenzima e o cofator, quando isolados, não tem catalítico. A associação destes dois, permite formar uma enzima ativa, que toma a designação de halo enzima. -Apoenzima que corresponde á molécula proteica. -Cofator que corresponde á substância de natureza não proteica. 10 ATIVIDADE LABORATORIAL - Propriedades das enzimas Fundamentos Teóricos: 11 É importante destacar que algumas moléculas de RNA, conhecidas como ribozimas, atuam como enzimas. Estas ainda apresentam papel catalisador, como dito anteriormente, atuam aumentando a velocidade das reações químicas. A designação de biocatalisador advêm do facto de serem compostos orgânicos presentes no organismo (bio), por aumentar a velocidade das reações (catalisador). Ao atuarem como catalisador diminuem a energia necessária para desencadear uma reação. Só deste modo é possível acelerar a velocidade da reação tornando assim permissível a ocorrência de um maior número de reação num determinado espaço de tempo. ATIVIDADE LABORATORIAL - Propriedades das enzimas As enzimas 12 Existem diversos fatores que condicionam a atividade enzimática entre as quais destacadas: Temperatura PH Concentração do Substrato Concentração da Enzima ATIVIDADE LABORATORIAL - Propriedades das enzimas Fatores que condicionam a atividade enzimática 15 Concentração do Substrato: O aumento da concentração da concentração do substrato aumenta a atividade enzimática o que pressupõe um aumento da velocidade da reação, desde que haja enzima disponível há qual o substrato se irá ligar. Quando deixa de haver enzima disponível (saturação da enzima) a velocidade da reação não aumenta, mantém-se constante. ATIVIDADE LABORATORIAL - Propriedades das enzimas Fatores que condicionam a atividade enzimática 16 Concentração da Enzima: Com o aumento da concentração da enzima dá- se, consequentemente, o aumento da atividade enzimática e o aumento da velocidade da reação deste que haja substrato disponível. ATIVIDADE LABORATORIAL - Propriedades das enzimas Fatores que condicionam a atividade enzimática ATIVIDADE LABORATORIAL - Propriedades das enzimas Resultados / Observações: 17 Observação 1 - Tubo 1 TUBO CONTEÚDO OBSERVAÇÕES 1 2 ml de H2O2 Quando se colocou o fósforo não houve libertação de oxigénio. ATIVIDADE LABORATORIAL - Propriedades das enzimas TUBO CONTEÚDO OBSERVAÇÕES 4 H2O2 + fígado cru do tubo 3 Reação intensa e formam-se muitas bolhas Resultados / Observações: 20 Observação 4 - Tubo 4 ATIVIDADE LABORATORIAL - Propriedades das enzimas TUBO CONTEÚDO OBSERVAÇÕ ES 5 2cm3 de cozimento de amido + 2 gotas de soluto de Lugol 10 min. banho- maria 37ºC A solução permanece azul Resultados / Observações: 21 Observação 5 - Tubo 5 ATIVIDADE LABORATORIAL - Propriedades das enzimas TUBO CONTEÚDO OBSERVAÇÕES 6 2cm3 de cozimento de amido + fígado cru + 2 gotas de soluto de Lugol 10 min. banho- maria 37ºC A solução permanece azul Resultados / Observações: 22 Observação 6 - Tubo 6 ATIVIDADE LABORATORIAL - Propriedades das enzimas Discussão de Resultados: O tubo adquiriu uma cor cinzenta escura devido ao dióxido de manganésio, e no instante em que este entrou em contacto com o substrato deu-se início à reação, devido a uma intensa libertação de energia. Esta foi provada pela rápida libertação de oxigénio. O gás formado originou também, algumas bolhas que subiram pelo tubo de ensaio. No Tubo 2 adicionou-se ao peróxido de hidrogénio, dióxido de manganésio, um catalisador inorgânico que, tal como foi possível observar-se, aumentou a velocidade da reação de degradação da água oxigenada. 2 25 No Tubo 3, onde se colocou o peróxido de hidrogénio com o fígado fresco esmagado, foi igualmente possível verificar-se a reação de degradação do primeiro, desta vez pel aação da enzima catalase presente no fígado fresco. Para uma melhor diferenciação e separação das células existentes no fígado fresco, esmagamo-lo com o ATIVIDADE LABORATORIAL - Propriedades das enzimas Discussão de Resultados: intuito de desprender e libertar as enzimas e substrato, através da libertação de oxigénio, na forma de bolhas, que ascenderam e transbordaram o tubo de ensaio e também pela libertação de oxigénio que verificamos ao colocarmo o fósforo na boca do tubo de ensaio ainda incandescente. 3 26 Voltou-se a verificar a libertação de oxigénio pelas bolhas que se formaram e que rapidamente ascenderam pelo tudo de ensaio,e também quando colocamos o fósforo e houve igualmente libertação de oxigénio. Assim, conclui-se que, uma vez formados os produtosa partir do substrato existente, as enzimasficam novamente livres para catalisarem novas reações, ou a mesma reação, caso seja com o mesmo substrato. No Tubo 4, colocou-se no peróxido de hidrogénio o fígado que retiramos do tubo 3 após ter terminado a reação, podemos observar que as enzimas do fígado não são consumidas pelas reações que catalisam. Verificou-se também, que a reação de degradação do mesmo voltou a ocorrer com a mesma intensidade. ATIVIDADE LABORATORIAL - Propriedades das enzimas Discussão de Resultados: 4 27 ATIVIDADE LABORATORIAL - Propriedades das enzimas Discussão de Resultados: No Tubo 6 adicionou-se também um pouco de cozimento de amido, 2 gotas de soluto de Lugol e um pouco de fígado esmagado anteriormente. Aqui também não ocorreram alterações no tubo de ensaio, que tinha uma coloração azul, devido ao soluto de Lugol, mesmo após os 10 minutos em banho-maria (temperatura 37ºC). 6 30 Contrariamente, no Tudo 7, onde se adicionou um também um pouco de cozimento de amido, 2 gotas de soluto de Lugol e um pouco de saliva, após 10 minutos em banho- maria (temperatura 37ºC), ocorreu já uma reação no interior do tubo de ensaio. O tubo, de coloração inicial azul, ficou então com um tom alaranjado, devido ao soluto de Lugol, pois 7 significa que ocorreu reação e que houve degradação do amido devido à ação da enzima amílase, presente na saliva. ATIVIDADE LABORATORIAL - Propriedades das enzimas Discussão de Resultados: 31 1) A temperaturas baixa ( no caso do fígado congelado ), bem como a temperatura elevada ( no caso do fígado “fervido” em banho-maria ), influenciam a atividade de enzimas como a catalase, inibindo-as de atuarem sobre o amido. Quando as enzimas são sujeitas a temperaturas muito baixas, a inativação é reversível ( após o tubo 4 ser retirado do banho-maria verificamos que aconteceu uma reação ). Em relação às enzimas que são submetidas a elevadas temperaturas, conclui-se que a sua inativação é irreversível ( após retirar o tubo 3 do banho-maria percebemos que não houve nenhuma reação ). Com esta atividade, chegamos à conclusão de que: - Existem dois fatores que condicionaram a atividade enzimática, a temperatura e pH; (1) - Existe especificidade entre enzimas e substrato. (2) 32 Conclusão ATIVIDADE LABORATORIAL - Propriedades das enzimas